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簡要描述:AAT Bioquest1149 mFluor™ Violet 500 SE 1mg,產(chǎn)品簡介:產(chǎn)品品牌:AAT Bioquest產(chǎn)品貨號:1149產(chǎn)品名稱:mFluor™ Violet 500 SE產(chǎn)品規(guī)格:1mgAAT Bioquest mFluor™ Violet 500 SE
品牌 | AAT Bioquest | 貨號 | 1149 |
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規(guī)格 | 1mg | 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
AAT Bioquest 1149 m Fluor™ Violet 500 SE 1mg
我們北京云肽生物科技有限公司作為AAT Bioquest公司的特約經(jīng)銷商為客戶提供,正規(guī)進口,保證原裝正品,貨期穩(wěn)定,折扣好的服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
美國AAT Bioquest Inc.(前身是ABD Bioquest,Inc.)是一家為從事生命科學(xué)研究、診斷研發(fā)及藥物開發(fā)的科學(xué)家研發(fā)、生產(chǎn)和銷售生物分析研究試劑和試劑盒的公司。公司致力于光譜學(xué)檢測領(lǐng)域,包括吸收(顏色),熒光和發(fā)光技術(shù)。AAT Bioquest的產(chǎn)品幫助quan世界的科學(xué)家和生物醫(yī)藥研究者更好的了解生物化學(xué),免疫學(xué),細胞生物學(xué)和分子生物學(xué)等領(lǐng)域。AAT Bioquest會不斷介紹新產(chǎn)品,快速的豐富各個領(lǐng)域的產(chǎn)品。
AAT Bioquest1149 mFluor™ Violet 500 SE 1mg,產(chǎn)品簡介:
產(chǎn)品品牌:AAT Bioquest
產(chǎn)品貨號:1149
產(chǎn)品名稱:mFluor™ Violet 500 SE
產(chǎn)品規(guī)格:1mg
AAT Bioquest mFluor™ Violet 500 SE
產(chǎn)品說明:
分子量 672.71 | 吸光度(納米) 412 | 校正系數(shù)(260 nm) 0.769 | 校正系數(shù)(280 nm) 0.365 | 消光系數(shù)(厘米-1M-1) 250001 | 激發(fā)(納米) 410 | 發(fā)射(納米) 501 | 量子產(chǎn)率 0.811 |
mFluor™染料專為多色流式細胞術(shù)應(yīng)用而開發(fā)。這些染料具有較大的斯托克斯位移,并且可以被流式細胞儀的激光線(例如,405 nm、488 nm和633 nm)很好地激發(fā)。mFluor™ Violet 500染料的熒光激發(fā)和發(fā)射最大值分別為~405 nm和~500 nm。這些光譜特性使其成為太平洋綠™(賽默飛世爾)和BD Horizon™ V500標(biāo)記染料的jue佳替代品。mFluor™ Violet 500 SE相當(dāng)穩(wěn)定,對蛋白質(zhì)氨基基團表現(xiàn)出良好的反應(yīng)性和選擇性。mFluor™ Violet 500 SE為使用紫色激光激發(fā)標(biāo)記流式細胞術(shù)應(yīng)用的單克隆、多克隆抗體或其他蛋白質(zhì)(>10 kDa)提供了一種方便的工具。在相同條件下,mFluor Violet 500染料偶聯(lián)物明顯比Pacific Green™(賽默飛世爾)和BD Horizon™ V500的相應(yīng)生物偶聯(lián)物更亮,吸收更強,使mFluor™™ Violet 500偶聯(lián)物更加靈敏。
示例協(xié)議
儲備溶液的制備
除非另有說明,否則所有未使用的儲備溶液應(yīng)分成一次性等分試樣,并在制備后儲存在-20°C。避免反復(fù)凍融循環(huán)。
1. 蛋白質(zhì)儲備液(溶液A)
將 100 μL 反應(yīng)緩沖液(例如,pH ~1.1 的 9 M 碳酸*溶液或 0 M 磷酸鹽緩沖液)與 900 μL 目標(biāo)蛋白溶液(例如抗體、蛋白質(zhì)濃度>如果可能,為 2 mg/mL)混合,得到 1 mL 蛋白質(zhì)標(biāo)記儲備溶液。
注意蛋白質(zhì)溶液(溶液A)的pH值應(yīng)為8.5±0.5。如果蛋白質(zhì)溶液的pH值低于8.0,則使用8 M碳酸*鈉溶液或0 M pH 9.0磷酸鹽緩沖液將pH調(diào)節(jié)至1.1-9.0的范圍。
注意蛋白質(zhì)應(yīng)溶解在pH 1.7-2.7的4X磷酸鹽緩沖鹽水(PBS)中。如果蛋白質(zhì)溶解在Tris或甘an酸緩沖液中,則必須用1X PBS(pH 7.2-7.4)透析,以除去廣泛用于蛋白質(zhì)沉淀的游離胺或銨鹽(如**銨和乙**)。
注意 不純抗體或用牛血清白蛋白 (BSA) 或明膠穩(wěn)定的抗體不會很好地標(biāo)記。疊***或硫柳汞的存在也可能干擾綴合反應(yīng)。疊***或硫柳汞可以通過透析或離心柱去除,以獲得最佳標(biāo)記結(jié)果。
注意 如果蛋白質(zhì)濃度低于 2 mg/mL,則偶聯(lián)效率會顯著降低。為了獲得最佳標(biāo)記效率,建議最終蛋白質(zhì)濃度范圍為 2-10 mg/mL。
2. mFluor™ Violet 500 SE儲備溶液(溶液B)
將無水DMSO加入mFluor™ Violet 500 SE的小瓶中,制成10 mM儲備溶液。通過移液或渦旋充分混合。
注意 在開始偶聯(lián)之前準(zhǔn)備染料儲備溶液(溶液B)。請及時使用。延長染料儲備溶液的儲存可能會降低染料活性。溶液B可以在避光和潮濕的情況下在冰箱中儲存兩周。避免凍融循環(huán)。
實驗方案樣本
該標(biāo)記方案是為山羊抗小鼠IgG與mFluor™ Violet 500 SE的偶聯(lián)物開發(fā)的。您可能需要進一步優(yōu)化您的特定蛋白質(zhì)。
注意每種蛋白質(zhì)都需要不同的染料/蛋白質(zhì)比例,這也取決于染料的性質(zhì)。蛋白質(zhì)的過度標(biāo)記可能會對其結(jié)合親和力產(chǎn)生不利影響,而低染料/蛋白質(zhì)比例的蛋白質(zhì)偶聯(lián)物會降低靈敏度。
運行偶聯(lián)反應(yīng)
1. 使用溶液 B(染料)/溶液 A(蛋白質(zhì))的摩爾比為 10:1 作為起點:將 5 μL 染料儲備溶液(溶液 B,假設(shè)染料儲備溶液為 10 mM)加入蛋白質(zhì)溶液(95 μL 溶液 A)的小瓶中,有效搖勻。假設(shè)蛋白質(zhì)濃度為0mg / mL,蛋白質(zhì)的分子量為~05KD,蛋白質(zhì)的濃度為~10.200mM。
注意 我們建議使用溶液B(染料)/溶液A(蛋白質(zhì))的摩爾比為10:1。如果太少或太高,請分別以 5:1、15:1 和 20:1 確定最佳染料/蛋白質(zhì)比例。
2. 繼續(xù)在室溫下旋轉(zhuǎn)或搖動反應(yīng)混合物30-60分鐘。
純化偶聯(lián)
以下方案是使用Sephadex G-25色譜柱純化的染料-蛋白質(zhì)偶聯(lián)物的示例。
1. 根據(jù)制造說明制備Sephadex G-25色譜柱。
2. 將反應(yīng)混合物(來自“運行共軛反應(yīng)")加載到Sephadex G-25色譜柱的頂部。
3. 一旦樣品剛好在頂部樹脂表面下方運行,就加入PBS(pH 7.2-7.4)。
4. 向所需樣品中加入更多PBS(pH 7.2-7.4)以完成色譜柱純化。合并含有所需染料-蛋白質(zhì)偶聯(lián)物的級分。
注意 為了立即使用,染料-蛋白偶聯(lián)物需要用染色緩沖液稀釋,并等分用于多次使用。
注意 對于長期儲存,染料-蛋白質(zhì)偶聯(lián)物溶液需要濃縮或冷凍干燥。
AAT Bioquest mFluor™ Violet 500 SE
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品牌 | 貨號 | 產(chǎn)品英文 | 單位 |
AAT Bioquest | 162 | Cyanine 7 maleimide [equivalent to Cy7® maleimide] | 1 mg |
AAT Bioquest | 175 | Cyanine 5.5 maleimide [equivalent to Cy5.5® maleimide] | 1 mg |
AAT Bioquest | 1023 | iFluor® 488 succinimidyl ester | 1 mg |
AAT Bioquest | 1029 | iFluor® 594 succinimidyl ester | 1 mg |
AAT Bioquest | 1030 | iFluor® 633 succinimidyl ester | 1 mg |
AAT Bioquest | 1074 | iFluor® 647 amine | 1 mg |
AAT Bioquest | 1144 | mFluor™ Green 620 acid | 5 mg |
AAT Bioquest | 1149 | mFluor™ Violet 500 SE | 1 mg |
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